バイオクロマトグラフィ
YMC-BioPro
様々なタンパク質、核酸類の分離に最適なイオン交換カラムです。非特異的吸着が極めて小さい親水性ポリマーに強アニオン/強カチオン交換基を導入しています。高分離・高吸着量のポーラスタイプと超高速分離に最適なノンポーラスタイプをラインナップしています。
また、精製用イオン交換担体は初期から中間精製に有効です。
仕様
| YMC-BioPro QA | YMC-BioPro SP | YMC-BioPro QA-F | YMC-BioPro SP-F | |
|---|---|---|---|---|
| 基材 | 親水性ポーラスポリマー | 親水性ノンポーラスポリマー | ||
| 粒子径 (μm) | 5 | |||
| 官能基 | -CH2N+(CH3)3 | -CH2CH2CH2SO3- | -CH2N+(CH3)3 | -CH2CH2CH2SO3- |
| 出荷時対イオン | Cl- | Na+ | Cl- | Na+ |
| イオン交換容量 (meq/mL-resin) |
0.075-0.100 | 0.070-0.095 | 0.075-0.110 | 0.230-0.290 |
| 動的吸着容量 (mg/mL-resin) |
>110 (BSA) | >70 (human-IgG) | >12 (BSA) | >10 (human-IgG) |
| 使用pH範囲 | 2-12 | |||
| カラム材質 | PEEK | |||
ポイント
- タンパク質の非特異的吸着が極めて小さい新開発の親水性ポリマー基材
- 官能基との相互作用を最大限に活かす表面構造
- 最密充填技術による従来にはない高理論段数と優れたピーク対称性
- 強アニオン交換体(QA)と強カチオン交換体(SP)
- 動的吸着容量・回収率が高く少量の精製にも有効なポーラスタイプ
- 超高速・高分離分析用にデザインされたノンポーラスタイプ
アプリケーション
優れた分離能
- Ribonuclease A (0.5 mg/mL)
- Cytochrome c (0.5 mg/mL)
- Lysozyme (0.5 mg/mL)
| Eluent | ： | A) 20 mM KH2PO4-K2HPO4 (pH 6.8) B) 20 mM KH2PO4-K2HPO4 (pH 6.8) containing 0.5 M NaCl 0-100%B (0-60 min) |
|---|---|---|
| Flow rate | ： | 0.5 mL/min for 4.6 mmI.D. 0.59 mL/min for 5.0 mmI.D. |
| Temperature | ： | 25℃ |
| Detection | ： | UV at 220 nm |
| Injection | ： | 20μL for 4.6 mmI.D. 23.6μL for 5.0 mmI.D. |
タンパク質の分離について、市販のカチオン交換カラムとYMC-BioPro SPの比較を示します。優れた分離能を有するYMC-BioPro SPは、試料に含まれる不純物の分離においても良好な分離を示します。
高い動的吸着容量および回収率
BSAの動的吸着容量および回収率
| Dynamic binding capacity (mg/mL-resin, 10% breakthrough) |
Eluted amount (mg/mL-resin) |
Recovery* (%) |
|
|---|---|---|---|
| YMC-BioPro QA | 126 | 120 | 95 |
| A社 (porous Q type) | 73 | 58 | 79 |
| B社 (porous Q type) | 100 | 35 | 35 |
*Recovery: (Eluted amount/Dynamic binding capacity) X 100
Breakthrough curves（破過曲線）
| Column | ： | YMC-BioPro QA 50 X 4.6 mmI.D. A社 (porous Q Type) 50 X 4.6 mmI.D. B社 (porous Q Type) 50 X 5.0 mmI.D. |
|---|---|---|
| Linear velocity | ： | 3.0 cm/min |
| Sample | ： | 1 mg/mL Bovine serum albumin (BSA) in equilibration buffer |
| Equilibration buffer | ： | 20 mM Tris-HCl (pH 8.6) |
| Elution buffer | ： | 20 mM Tris-HCl (pH 8.6) containing 1.0 M NaCl |
| Detection | ： | UV at 280 nm |
YMC-BioProポーラスタイプは、非特異的吸着が極めて小さい親水性ポリマーを基材としたイオン交換カラムで、タンパク質と相互作用しやすい表面構造を有しています。このため、タンパク質に対して高い動的吸着容量および回収率を示します。
大量負荷でも分離能が低下しない高吸着能
大量負荷における分離能
- Ovalbumin
- Trypsin inhibiter
| Eluent | ： | A) 20 mM Tris-HCl (pH 8.1) B) 20 mM Tris-HCl (pH 8.1) containing 0.5 M NaCl 10-80%B (0-30 min) |
|---|---|---|
| Flow rate | ： | 0.5 mL/min |
| Temperature | ： | 25℃ |
| Detection | ： | UV at 280 nm |
| Injection | ： | 100μL |
市販のカラムでは、負荷量が少ない場合でもピーク形状が悪く分離不十分ですが、YMC-BioPro QAはサンプルの負荷量を上げても良好なピーク形状を示します。トータル負荷量を上げてマイナーピークまで検出したい場合や小スケールの精製を行う場合にも有効です。
超高速分析に有効なノンポーラス30mm長カラム
- Ribonuclease A
- Cytochrome c
- Lysozyme
| Eluent | ： | A) 20 mM KH2PO4-K2HPO4 (pH 6.8) B) 20 mM KH2PO4-K2HPO4 (pH 6.8) containing 0.5 M NaCl 0-100%B (0-4 min) for YMC-BioPro SP-F 0-100%B (0-60 min) for YMC-BioPro SP |
|---|---|---|
| Temperature | ： | 25℃ |
| Detection | ： | UV at 220 nm |
| Injection | ： | 20μL |
ノンポーラスカラムとポーラスカラムでタンパク質の分離を比較しています。YMC-BioProノンポーラスタイプは、基材の機械的強度に優れ、カラム効率が高いため流速をあげた高速分析に適しています。
極めて高い分離能を有するノンポーラス100mm長カラム
| Eluent | ： | A) 20 mM Tris-HCl (pH 8.1) B) 20 mM Tris-HCl (pH 8.1) containing 0.5 M NaCl 10-25%B (0-60 min) |
|---|---|---|
| Flow rate | ： | 1.0 mL/min |
| Temperature | ： | 25℃ |
| Detection | ： | UV at 220 nm |
| Injection | ： | 14μL (0.1 mg/mL) |
| Sample | ： | Mouse monoclonal IgG1 anti-human IgG4 (Purified by DEAE chromatography, containing NaN3) |
DEAEクロマトグラフィで精製された市販モノクローナル抗体について、試薬ロットが異なるものをYMC-BioPro QA-Fの長さ100mmのカラムで分析しています。各ロットとも多数のピークが認められ、ロットにより異なるクロマトグラムが得られています。YMC-BioPro ノンポーラスタイプの100mm長カラムは極めて高い分離能を有しているため、抗体など糖タンパク質の分子種の分離に有効で、バイオ医薬品の品質管理にも適用できます。