カラム
Accura Triartは、フリットを含む接液部をバイオイナートコーティング処理したカラムハードウェアに、Triart充填剤を充填したカラムです。非特異的吸着が抑制されるため、高感度でシャープなピーク形状が得られ、LC-MSでの検出限界が向上します。キャリーオーバーが低減され、定量性の改善も期待できます。また、マスキング処理などのプレコンディショニングが不要で分析効率が向上し、良好な再現性が得られます。核酸やペプチド・タンパク質など吸着性、配位性成分の分析に最適です。
Accura、内面PEEK製、およびステンレス製のカラムハードウェアのみ（充填剤なし）を接続し、吸着しやすいオリゴ核酸の溶出率を比較しました。 ステンレス製ハードウェアでは初期注入時に吸着が大きく、連続注入することで改善しますが、20回注入してもAccuraよりも溶出率が低くなっています。内面PEEK製ハードウェアは、移動相の種類によっては吸着して検出感度が低くなる場合があります。Accuraでは、初回注入時から吸着することなく溶出しており、安定して良好な感度、回収率が得られます。
| 移動相条件1 | 8 mM TEA*-200 mM HFIP**/methanol (82/18) |
|---|
*triethyl amine,**1,1,1,3,3,3 hexafluoro-2-propanol
| 移動相条件2 | 100 mM TEAA* (pH 8)/methanol (82/18) |
|---|
*triethylammonium acetate
| Column size | 50 X 2.1 mmI.D. |
|---|---|
| Flow rate | 0.42 mL/min |
| Detection | UV at 260 nm |
| Sample | All PS RNA 20mer |
ハードウェア素材の異なる同一充填剤のカラムで、RNAマーカーを繰り返し分析しました。Accuraでは、初回注入時から安定した再現性の良いピーク面積値が得られています。ステンレス製カラムでは、初回注入時の面積値が小さく、吸着が認められます。分析を繰り返すことで徐々にピークが溶出していますが、10回目の注入においても吸着があり、Accuraよりも面積値が小さいです。
Accura Triartは吸着しやすいRNA分析においてもマスキング処理などのプレコンディショニングの必要がなく、分析が効率化できます。
| Column | YMC-Triart Bio C4 (3 μm, 30 nm) 100 X 2.1 mmI.D. |
|---|---|
| Eluent | A) 50 mM TEAA (pH 7.0)/acetonitrile (95/5) B) 50 mM TEAA (pH 7.0)/acetonitrile (50/50) 9–14%B (0–10 min) |
| Flow rate | 0.2 mL/min |
| Temperature | 80℃ |
| Detection | UV at 254 nm |
| Sample | Century™-Plus RNA Markers |
Accuraおよびステンレス製カラムにTriart充填剤を充填し、オリゴ核酸、ペプチド、およびトリプトファン代謝物を分析しました。Accuraではステンレス製カラムに比べ吸着が抑制されてピークの高さが高く、高感度で検出可能です。
1. All PS RNA 20mer
2. All PS RNA 21mer
| Column | YMC-Triart Bio C18 (1.9 μm, 30 nm) 50 X 2.1 mmI.D. |
|---|---|
| Eluent | A) 15 mM TEA-400 mM HFIP B) methanol 8–18%B (0–10 min) |
| Flow rate | 0.42 mL/min |
| Temperature | 65°C |
| Detection | UV at 260 nm |
1. Exenatide
2. Semaglutide
3. Retatrutide
4. Tirzepatide
5. Liraglutide
| Column | YMC-Triart Bio C18 (1.9 μm, 30 nm) 100 X 2.1 mmI.D. |
|---|---|
| Eluent | A) water/formic acid (100/0.1) B) acetonitrile/formic acid (100/0.1) 30–60%B (0–6 min), 90%B (6–12 min) |
| Flow rate | 0.4 mL/min |
| Temperature | 60°C |
| Detection | MS (ESI+) |
1. Quinolinic acid
2. Picolinic acid
3. Kynurenine
4. Xanthurenic acid
5. Kynurenic acid
6. Tryptophan
| Column | YMC-Triart C18 (1.9 μm, 12 nm) 50 X 2.1 mmI.D. |
|---|---|
| Eluent | A) 10 mM ammonium formate–formic acid (pH 3.7) B) acetonitrile 5–50%B (0–3 min) |
| Flow rate | 0.4 mL/min |
| Temperature | 40°C |
| Detection | UV at 254 nm |
