カラム
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Accura Triartは、フリットを含む接液部をバイオイナートコーティング処理したカラムハードウェアに、有機シリカハイブリッド基材で耐久性に優れたYMC-Triart充填剤を充填したカラムです。
非特異的吸着が抑制されるため、プレコンディショニングが不要で分析効率が向上し、良好な再現性が得られます。
また、高感度でシャープなピーク形状が得られ、LC-MSでの検出限界が向上します。キャリーオーバーが低減され、定量性の改善も期待できます。
核酸やペプチド・タンパク質など吸着性、配位性成分の分析に最適です。
Accuraおよびステンレス製のカラムハードウェアのみ（充填剤なし）を接続し、吸着しやすいオリゴ核酸の溶出率を比較しました。
ステンレス製ハードウェアでは初期注入時に吸着が大きく、連続注入することで改善しますが、20回注入してもAccuraよりも溶出率が低くなっています。
Accuraでは、初回注入時から吸着することなく溶出しており、安定して良好な感度、回収率が得られます。
| Eluent | 8 mM TEA* 200 mM HFIP**/methanol (82/18) |
|---|---|
| Sample | All PS RNA 20mer |
*triethylamine **1,1,1,3,3,3 hexafluoro-2-propanol
Triart Bio C18 を用いたオリゴ核酸の分析において、Accuraではステンレス製カラムに比べ吸着が抑制されてピーク高さが高く、高感度で検出できます。
1. All PS RNA 20mer
2. All PS RNA 21mer
| Column | Triart Bio C18 (1.9 µm, 30 nm) 50 X 2.1 mmI.D |
|---|---|
| Eluent | A) 15 mM TEA 400 mM HFIP B) methanol 8-18%B (0-10 min) |
| Flow rate | 0.42 mL/min |
| Temperature | 65°C |
| Detection | UV at 260 nm |
Accura Triart Bio C4は、AAVカプシドタンパク質の分析においてもシャープなピーク形状を示し、市販C4カラムでは分離困難なVP1とVP2が良好に分離できます。
Courtesy of Prof. S. Uchiyama, Osaka University
This research was supported by AMED under Grant Number JP18ae0201001.
Denatured AAV2
1. VP2 : 139A-735L
2. VP1(Ac) : 2A(Ac)-735L
3. VP3(Ac) : 204A(Ac)-735L
4. VP3(Ac) variant : 212A(Ac)-735L
| Column | 150 X 2.1 mmI.D |
|---|---|
| Eluent | A) water/difluoroacetic acid (100/0.1） B) acetonitrile/difluoroacetic acid (100/0.1） 20-32%B (0-1 min), 32-36%B (1-16 min), 36-80%B (16-20 min) |
| Flow rate | 0.2 mL/min |
| Temperature | 80°C |
| Detection | UV at 280 nm |
