マクロポアイオン交換担体
MacroSep IEX Q

MacroSep IEX Qは独自のマクロポア構造を有し、分子量やサイズが大きいモダリティに合わせて担体設計を最適化しているため、高分離・高吸着容量・高速の精製が可能です。ウイルスベクターやプラスミドDNAなどの新モダリティの精製に最適です。

MacroSep IEX Q 担体

BioPro IEX SmartSep 担体

仕様
基材	親水性メタクリレートポリマー
粒子径	30 µm
細孔径	900 nm
イオン交換基	-R-N⁺(CH₃)₃
イオン交換容量 (meq/mL-resin)	>0.08
動的吸着容量 (mg/mL-regin)	30 (Thyroglobulin)
使用pH範囲	2-12

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製品の特長

■ 新開発マクロポア構造の強アニオン交換担体
■ ウイルスベクターやプラスミドDNAなどサイズが大きい新モダリティの精製に最適
高流速でも高い分離能を維持
AAVのFullカプシドの高純度精製が可能
プラスミドDNAのアイソフォーム分離
プラスミドDNAの高い動的吸着容量（DBC）および高回収率

高流速でも高い分離能を維持

アデノ随伴ウイルス（AAV）のFull/Emptyカプシドの分離において、流速を高くすると、市販イオン交換担体ではピークのブロードニングが認められますが、MacroSep IEX Qでは良好な分離が維持されています。
MacroSep IEX Qでは、高い流速でも分離能が低下しないため、精製時間の短縮が可能です。

Column	50 X 5.0 mmI.D. (1 mL)
Eluent	A) 20 mM Bis-tris propane-HCl (pH 9.0) B) 20 mM Bis-tris propane-HCl containing 0.5 M TMAC* (pH 9.0)
Gradient	10-50%B (45 CV)
Temperature	25°C
Detection	FLS at Ex. 280 nm, Em. 348 nm
Injection	30 µL
Sample	AAV2 (1.07 X 10¹¹ vg/mL)

* tetramethylammonium chloride
This research was supported by AMED under Grant Number JP18ae0201001.

AAVのFullカプシドの高純度精製が可能

AAVのFull/Emptyカプシドの分離例を示しています。Fullカプシドの精製フラクションの純度は、超遠心分析（AUC）で約85%と高い値を示しました。
MacroSep IEX QはFull/Emptyカプシドの分離が良好で、AAVのクロマトグラフィー精製に適しています。

Column	MacroSep IEX Q (30 µm) , 90 X 15 mmI.D. (16 mL)
Eluent	A) 20 mM Bis-tris propane-HCl (pH 9.0), 1% sucrose, 0.1% poloxamer 188 B) 20 mM Bis-tris propane-HCl containing 0.5 M CC* (pH 9.0) ,1% sucrose, 0.1% poloxamer 188 20-50%B (33.75 CV)
Flow rate	31.8 mL/min (1080 cm/hr)
Temperature	ambient
Detection	UV at 260 nm
Injection	358 mL
Sample	AAV2 (4.27 X 10¹² vg/mL)

* choline chloride
This research was supported by AMED under Grant Number JP18ae0201001.

プラスミドDNAのアイソフォーム分離

プラスミドDNAのアイソフォーム分離において、MacroSep IEX Qは市販イオン交換担体に比べシャープなピーク形状が得られ、トランスフェクション効率が高いsupercoiled体と、効率低下の原因となるlinear体およびopen circular体を良好に分離できています。

Column	50 X 5.0 mmI.D. (1 mL)
Eluent	A) 20 mM Tris-HCl (pH 8.5) B) 20 mM Tris-HCl (pH 8.5) containing 1.0 M NaCl
Gradient	[MacroSep IEX Q] 82%B (0-1.5 min), 82-86%B (1.5-22.5 min) [市販イオン交換担体A] 77%B (0-1.5 min), 77-81%B (1.5-22.5 min)
Flow rate	0.4 mL/min (122 cm/hr)
Temperature	25°C
Detection	UV at 260 nm
Injection	10 µL (60 µg/mL)
Sample	[SC] pUC19 plasmid extracted from E. coli (2686 bp) [OC] pUC19 plasmid digested with nicking endonuclease Nt.BspQΙ [L] pUC19 plasmid digested with restriction enzyme BamHΙ

プラスミドDNAの高い動的吸着容量(DBC)および高回収率

MacroSep IEX Qは、従来品に比べ、大きな生体分子に対して高いDBCを示す設計をしています。大きな分子のプラスミドDNAについて、MacroSep IEX Qと市販イオン交換担体を比較しました。MacroSep IEX Qの方が高いDBCを示し、回収率も良好で、生産性の向上が期待できます。

Breakthrough curves

Column	[MacroSep IEX Q] 26 X 7 mmI.D. (1 mL) [市販イオン交換担体C] 20 X 8 mmI.D. (1 mL)
Equilibration buffer	100 mM CH₃COONa-CH₃COOH (pH 5.0)
Elution buffer	Equilibration buffer containing 1 M NaCl
Flow rate	0.5 mL/min (Residence time 2 min)
Temperature	ambient
Detection	UV at 260 nm
Sample	pRP[Exp]-Puro-TRE3G>EGFP (4934 bp)
Sample Concentration	0.2 mg/ml pDNA in Equilibration buffer containing 0.15 M NaCl

Comparisons of DBC and recovery for pDNA

	DBC (mg/mL-resin, 10% breakthrough)	Recovery* (%)
MacroSep IEX Q	7.5	101
市販イオン交換担体C	1.3	101

*Recovery: (Eluted amount/Adsorption amount) X 100

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